脉冲电场消融(Pulsed Field Ablation,PFA)是一种新型非热的消融方式，其作用机理是不可逆电穿孔。该方法具有无热损伤、消融组织梯度选择性、速度快等优点。近年的研究表明PFA在房颤消融上具有潜在优势，但对消融参数和内在机制尚不明确。该项研究尚在起步阶段，PFA对消融术中主要细胞(心肌细胞和平滑肌细胞)的杀伤量效关系还不明确，在动物实验中的消融剂量及手术方式，评价指标均需要研究。本文从细胞学和大动物实验两个方面对杀伤效果进行了初步实验研究，明确了脉冲场消融的量效关系和评价体系，通过体内外实验探索PFA对心肌组织的消融效果及机制，为进一步的临床实验提供实验依据。

建立单个细胞(电极杯系统)和单层细胞(培养小室insert系统)两种模式对心肌细胞H9C2(2-1)和平滑肌细胞A7r5进行PFA干预，分别采用MTT法、活死细胞染色法来评价消融效果(场强范围250-1250 V/cm，脉冲模式：双向短脉冲、单向短脉冲和单向长脉冲)。钙离子染色观察PFA的即时消融效应，免疫荧光观察PFA消融对两种细胞表达CX45蛋白的影响，扫描电镜观察PFA对细胞损伤的微观表现。3只巴马香猪(80KG)被用来验证PFA对心肌细胞的在体消融效果，起搏电传导检测即时消融效果，造影确定是否有肺静脉狭窄，HE、Masson染色和tunel染色观察心肌细胞在PFA消融后的病理变化。

单细胞PFA体系中，H9C2(2-1)和A7R5两种细胞对PFA的响应无明显差别，其存活率依赖于场强和脉冲模式。而单层细胞体系中，H9C2(2-1)明显比A7R5对PFA敏感，且表现为整个细胞单层向中心皱缩。消融后，H9C2(2-1)表达CX45蛋白增加，细胞间连接完整。双向脉冲消融效果弱于单向脉冲，但心肌细胞皱缩和细胞间连接的完整，3种模式脉冲没有差别。扫描电镜证实PFA消融后两种细胞发生了不可逆电穿孔。动物实验表明双向脉冲PFA能有效阻断肺静脉和心房间的电活动，且肌肉收缩不明显，未产生肺静脉狭窄。消融组织凋亡明显，结缔组织无损伤。

双向脉冲PFA能显著消融心肌细胞，保持细胞间连接完整，并降低肌肉收缩，是一种优化的房颤PFA消融策略。